Continuamos ...
Agradecemos muy cordialmente a los profesores:
Manuel Díez
Araceli Gallego
César Benito
Su gentileza al autorizarnos el uso de este excelente material.
Universidad Complutense de Madrid
AULA VIRTUAL DE GENÉTICA
http://www.ucm.es/info/genetica/AVG/
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2.1.- Representar gráficamente los resultados que se obtendrían en el experimento de Meselson y Stahl al cabo de media, una y dos generaciones celulares:
a) Si la replicación fuera semiconservativa.
b) En el caso en que la replicación fuera conservativa.
La hipótesis de replicación semiconservativa del ADN fue propuesta por Watson y Crick. Según este modelo la doble hélice de ADN se separaría en sus dos hebras y cada una de ellas serviría de molde siguiendo las reglas de complementaridad de las bases nitrogenadas para sintetizar una nueva hebra. Al final del proceso obtendríamos dos dobles hélices, cada una con una hebra vieja y otra de nueva síntesis.
El ADN de las bacterias que crecen en un medio con N14 tiene una menor densidad y migra al centrifugar en gradiente de CsCl hacia la boca del tubo. En primer lugar, en el experimento de Meselson y Stahl las bacterias se mantienen creciendo durante 14 generaciones en medio con N15. De esta forma se consigue que el ADN de todas las bacterias del cultivo esté constituido por bases nitrogenadas con N15 (pesado). Cuando se extrae el ADN de estas bacterias y se centrifuga en gradiente de densidad de CsCl se observa una sola banda que migra hacia el fondo del tubo. El ADN de las bacterias que crecen en un medio con N14 tiene una menor densidad y migra al centrifugar en gradiente de CsCl hacia la boca del tubo. Posteriormente, las bacterias se pasan a un medio que contienen N14 (normal) y a distintos tiempos ( ½ , 1 y 2 generaciones) se toma una muestra del cultivo, se extrae el ADN y se centrifuga en gradiente de CsCl. A la media generación ( ½ ), se habrá replicado la mitad del ADN, por tanto, tendremos dobles hélices que aún no se han replicado con ambas cadenas formadas por N15 (pesado) y dobles hélices ya replicadas con una hebra vieja (N15) y otra de nueva síntesis (N14). Al centrifugar obtendremos dos bandas, una con densidad correspondiente al N15 (doble hélice vieja, aún no replicada) y otra con densidad intermedia N14-15 (ADN ya replicado). La banda de densidad intermedia N14-15 contendrá doble cantidad de ADN que la banda de densidad N15. En la primera generación de replicación todo el ADN tendrá una cadena vieja (N15) y una de nueva síntesis (N14), al centrifugar se observará una sola banda de densidad intermedia (N14-15). En la segunda generación de replicación tendremos moléculas de ADN doble hélice de densidad intermedia (N14-15) y moléculas de ADN doble hélice con las dos hebras constituidas por N14. Por tanto, al centrifugar observaremos dos bandas una de densidad intermedia (N14-15) y otra con densidad correspondiente al N14.
En el siguiente esquema se resumen los resultados que se obtendrían si la replicación fuera semiconservativa:
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